Продукция

Аналитические методы и энзимология

В чём заключается уникальность предлогаемой вами методики обучения аналитическим методам и энзимологии?
Предлогаемый курс включает в себя поэтапное развитие познаний в данной области. Наборы сконструированны так, что каждая последующая стадия является дополнением предыдущей, а предедущая в свою очередь является базовой информацией последующего. Ферменты и другие биологически активные соединения (БАС), внесены в таких концентрациях, которые необходимы для проведения того или иного лабораторного практикума.Конечным результатом данных работ являюся графики зависимостей различных величин. Эти графики строятся на базе полученных данных экспериментатора и они должны оказатся в тех приделах которые необходимы для того чтобы вывести то или иное заключение. А это достигается за счет правильного дозирования БАС в предлогаемых вам наборах.

1) Цель Семестра
Обучить студентов моделировать и определять активность ферментов на примере инвертазы.

2) Помимо оптимумов Т (тепература) и pН (кислотность), что ещё надо знать для моделирования активности ферментов?
Помимо оптимумов Т (тепература) и pН (кислотностсти) которые принимаются как известные. Критическим является определение концентрации субстрата для моделирования ферментативной активности.

3) Как определить концентрацию субстрата [S]?
Концентрация субстрата [S]=10Km, где Км = Константа Михаэлиса.

4) Как определить константу Михаэлиса Km?
Км-определяется из зависимости максимальной скорости реакции Vmax и концентрации субстрата [S]. Скорость реакции определяется измерением конце нтрации продукта (глюкозы) во времени.

5) Как определять концентрацию глюкозы?
Концентрация глюкозы определяется из калибровочной кривой глюкозы.

6) Как построить калибровочную кривую глюкозы?
Калибровочная крвая глюкозы строится из зависимостей стандартных растворов глюкозы и их оптических показателей. На базе этой информации расчитывается общая активность. Наиболее важным является подсчёт удельной активности.

7) Как расчитать удельную активность фермента?
Для расчёта удельной активности необходимо определить концентрацию белка которая определяется из калибровочной кривой белка.Отношение значений общей активности к концентрации белка--даёт показатель удельной активности.

8) Как построить калибровочную кривую белка?
Калибровочная кривая белка строится из зависимостей стандартных растворов белка и их оптических показателей. От этой зависимости рассчитывается концентрация белка.

Ионообменная хроматография

В чём заключается уникальность предлогаемой вами методики обучения ионнообменной хроматографии?
Адсорбент (белок)-предокрашен и адсорбируясь, меняет цвет носителя в колонке с белого на синий. В процессе хроматографии при увеличении ионной силы и замене pН белок смывается с колонки и благодаря уникальной технологии место десорбции окрашивается в красный цвет т.е. Визуально можно наблюдать, как и в каком месте произошла посадка белка и когда и где он смывается. Более того, нами используется предокрашенный маркер, который визуально просматривается в процессе разделения, поэтому отпадает необходимость в дополнительном оборудовании для детекции разделяющихся компонентов.

Гель-фильтрация

В чём заключается уникальность предлогаемой вами методики обучения гель-фильтрации?
Классически гель-фильтрация проводится на колонке размером 1-1,5 м. Используется носитель типа SEPHADEX, который делит белки в различных диапазонах хотя для разделения ему требуется от 10 часов до 3 суток. Для детекции необходимо также иметь ультрафиолетовый детектор, самописец и коллектор. В предлогаемых нами наборах, используется колонка размером 27 см и специально созданый полимер, который имеет способность разделения в течении 40 мин на колонке этого размера.

Тонкослойнная хроматография

В чём заключается уникальность предлогаемой вами методики обучения тонкослойной хроматографии?
В предлогаемой нами методике используются предокрашенные маркеры, которые имеют способность делится на маленьком расстоянии. В процессе хромотографии визуально можно увидеть как происходит разделение на отдельные компоненты из внесённой смеси.